Unsa ang Sulforaphane?

Sulforaphane usa ka phytochemical, usa ka substansiya sulod sa isothiocyanate nga grupo sa mga organosulfur compound, nga makita sa cruciferous nga mga utanon, sama sa broccoli, cabbage, cauliflower, ug Brussels sprouts. Makita usab kini sa bok choy, kale, collards, mustard greens ug watercress. Gipakita sa mga panukiduki sa panukiduki nga ang sulforaphane makatabang sa pagpugong sa lainlaing klase sa kanser pinaagi sa pagpaaktibo sa produksyon sa Nrf2, o nuclear factor nga erythroid 2-related factor, usa ka transcription factor nga nag-regulate sa mga mekanismo sa panalipod nga antioxidant nga nagkontrol sa tubag sa cell sa mga oxidant. Ang katuyoan sa mosunod nga artikulo mao ang paghulagway sa function sa sulforaphane.

abstract

Ang KEAP1-Nrf2-ARE nga sistema sa antioxidant usa ka punoan nga paagi diin ang mga selyula motubag sa oxidative ug xenobiotic stress. Sulforaphane (SFN), usa ka electrophilic isothiocyanate nga nakuha gikan sa cruciferous nga mga utanon, nagpalihok sa KEAP1-Nrf2-ARE nga agianan ug nahimong usa ka molekula-sa-interes sa pagtambal sa mga sakit diin ang chronic oxidative stress adunay dakong etiological nga papel. Gipakita namo dinhi nga ang mitochondria sa kultura, human retinal pigment epithelial (RPE-1) nga mga selula nga gitambalan sa SFN nagpailalom sa hyperfusion nga independente sa Nrf2 ug sa cytoplasmic inhibitor KEAP1 niini. Ang mitochondrial fusion gikataho nga cytoprotective pinaagi sa pagpugong sa pore formation sa mitochondria atol sa apoptosis, ug nahiuyon niini, gipakita namo ang Nrf2-independent, cytoprotection sa SFN-treated cells nga naladlad sa apoptosis-inducer, staurosporine. Sa mekanikal nga paagi, ang SFN nagpagaan sa pagrekrut ug / o pagpabilin sa matunaw nga fission factor nga Drp1 sa mitochondria ug sa mga peroxisome apan dili makaapekto sa kinatibuk-ang kadagaya sa Drp1. Gipakita niini nga mga datos nga ang mapuslanon nga mga kabtangan sa SFN lapas pa sa pagpaaktibo sa sistema sa KEAP1-Nrf2-ARE ug gigarantiyahan ang dugang nga pagsukitsukit nga gihatag ang karon nga paggamit niini nga ahente sa daghang mga pagsulay sa klinika.

keywords: Sulforaphane, Nrf2, Drp1, Mitochondria, Fission, Fusion, Apoptosis

Pasiuna

Ang Sulforaphane usa ka Nrf2-Independent Inhibitor sa Mitochondrial Fission

Ang Sulforaphane (SFN) usa ka isothiocyanate compound nga nakuha sa pagkaon nga kasagaran gikan sa cruciferous nga mga utanon [56]. Namugna kini sa mga tanom isip xenobiotic nga tubag sa predation pinaagi sa vesicular release sa hydrolytic enzyme myrosinase gikan sa nadaot nga mga selula; kini nga enzyme nag-convert sa mga glucosinolates ngadto sa isothiocyantes [42]. Sulod sa miaging duha ka dekada, ang SFN kaylap nga gihulagway alang sa gitaho nga anticancer, antioxidant, ug antimicrobial nga mga kabtangan [57]. Kadaghanan sa kini nga kaepektibo gipasangil sa kapasidad sa SFN nga modulate ang KEAP1-Nrf2-antioxidant response element (ARE) signaling pathway, bisan kung ang dugang nga mga kalihokan sa compound nahibal-an, lakip ang pagdili sa histone deacetylase nga kalihokan ug pag-uswag sa cell cycle [ 29]. Ang Nrf2 mao ang master antioxidant transcription factor ug ubos sa mga kondisyon sa homeostasis, ang kalig-on niini gipugngan pinaagi sa aksyon sa cytoplasmic Cullin3KEAP1 ubiquitin ligase complex [20]. Sa espesipiko, ang Nrf2 gi-recruit sa Cullin3KEAP1 ligase pinaagi sa pagbugkos sa dimeric substrate adapter KEAP1 ug pagkahuman giusab sa polyUb chains nga nagpunting sa transcription factor alang sa proteasome-mediated degradation. Kini nga constitutive turnover naglimite sa katunga sa kinabuhi sa Nrf2 sa wala ma-stress nga mga selula ngadto sa ~ 15 min [30], [33], [46], [55]. Agig tubag sa daghang mga matang sa tensiyon, labi na ang oxidative stress, KEAP1, usa ka protina nga puno sa cysteine ​​​​, naglihok isip redox sensor, ug oxidative modification sa mga kritikal nga cysteinees, ilabi na ang C151, sa KEAP1 nagdissociate sa Nrf2-KEAP1 gikan sa CUL3 sa ingon mapugngan ang Nrf2 degradation. 8], [20], [55]. Ilabi na, ang SFN, ug posible nga uban pang mga activator sa Nrf2, nagsundog sa stress sa oxidative pinaagi sa pag-usab sa C151 sa KEAP1 eg [21]. Ang pagpalig-on sa Nrf2 nagtugot sa paghubad niini ngadto sa nucleus diin kini nag-aghat sa pagpahayag sa usa ka baterya sa Phase II antioxidant ug detoxification genes. Ang Nrf2 nagbugkos sa antioxidant response promoter elements (ARE) sa mga cognate target genes niini pinaagi sa heterodimerization nga adunay gagmay nga mga protina sa Maf [19]. Kini nga sistema nagpresentar sa usa ka dinamiko ug sensitibo nga tubag sa dili direkta nga antioxidants sama sa SFN, free radicals nga namugna sa mitochondria [16], o uban pang physiologic nga tinubdan sa oxidative stress [41].

Ang mitochondria mga dinamiko, subcellular organelles nga nag-regulate sa daghang mga function sa cellular gikan sa produksiyon sa ATP ug intracellular calcium buffering hangtod sa redox regulation ug apoptosis [13], [49]. Ang mitochondria nagrepresentar usab sa panguna nga gigikanan sa reactive oxygen species (ROS) sa sulod sa selyula. Ang husto nga regulasyon sa mitochondrial function busa gikinahanglan alang sa pag-optimize sa produksiyon sa ATP aron matubag ang mga panginahanglanon sa cellular samtang dungan nga gipamenos ang posibleng makadaot nga mga epekto sa sobra nga produksyon sa free radical. Ang usa ka kritikal nga kinahanglanon alang sa maayo nga modulasyon sa mitochondrial function mao ang kapasidad sa mitochondria nga molihok nga independente ingon mga biochemical machine ug isip bahin sa usa ka halapad, responsive nga network.

Ang morphology ug function sa Mitochondrial network gitino pinaagi sa usa ka regulated nga balanse tali sa fission ug fusion. Ang mitochondrial fission gikinahanglan alang sa anak nga babaye nga cell inheritance sa mitochondria atol sa cell division [28] ingon man alang sa pinili, autophagic degradation sa depolarized o nadaot nga mitochondria, nga gitawag mitophagy [1]. Sa kasukwahi, gikinahanglan ang fusion alang sa komplementasyon sa mitochondrial genome ug pagpaambit sa mga component sa electron transport chain tali sa silingang mitochondria [54]. Sa lebel sa molekula, ang mitochondrial fission ug fusion gi-regulate sa dagko, sama sa dinamin nga GTPases. Tulo ka mga enzyme ang panguna nga nag-regulate sa fusion: Ang Mitofusins ​​1 ug 2 (Mfn1/2) mga two-pass outer membrane nga mga protina nga nagpataliwala sa outer membrane fusion pinaagi sa heterotypic nga mga interaksyon tali sa kasikbit nga mitochondria [15], [25], [37], samtang ang OPA1 usa ka sulod. protina sa lamad nga dungan nga nagsiguro sa koneksyon sa matrix pinaagi sa pag-regulate sa pagtunaw sa sulod nga mga lamad [5]. Ang kalihokan sa GTPase sa tanan nga tulo ka mga protina gikinahanglan alang sa lig-on nga fusion [5], [18], ug ang OPA1 dugang nga gikontrol sa komplikadong proteolysis sulod sa mitochondrial inner membrane sa mga protease nga OMA1 [14], PARL [6], ug YME1L [45]. ]. Importante, ang intact nga mitochondrial membrane nga potensyal gikinahanglan alang sa episyente nga fusion aron mapugngan ang paghiusa sa nadaot ug himsog nga mitochondria [26].

Ang mitochondrial fission sa panguna gi-catalyzed sa usa ka cytosolic nga protina nga gitawag nga Dynamin-related protein 1 (Drp1/DNM1L). Ang Drp1 gi-recruit gikan sa cytosol ngadto sa umaabot nga mga dapit sa fission sa mitochondrial outer membrane [43]. Ang mga mayor nga receptors alang sa Drp1 sa gawas nga lamad mao ang mitochondrial fission factor (Mff) [32] ug, sa usa ka gamay nga gidak-on, Fission 1 (Fis1) [51]. Dugang pa, ang usa ka decoy receptor, MIEF1 / MiD51, nadiskobrehan nga naglihok aron dugang nga limitahan ang kalihokan sa Drp1 nga protina sa mga potensyal nga fission site [58]. Sa higayon nga nakadunggo sa mitochondrial outer membrane, ang Drp1 oligomerizes ngadto sa spiral-like structures sa palibot sa lawas sa mitochondrion ug dayon naggamit sa enerhiya nga nakuha gikan sa GTP hydrolysis aron sa pagpataliwala sa pisikal nga scission sa mitochondrial sa gawas ug sa sulod nga mga lamad [17]. Ang endoplasmic reticulum-derived tubules naglihok isip inisyal nga constrictor sa mitochondria sa wala pa ang Drp1 oligomerization, nga nagpasiugda sa pagpadayag nga ang non-constricted mitochondria mas lapad kay sa permissive circumference sa usa ka nahuman nga Drp1 spiral [12]. Importante usab ang actin dynamics alang sa mga interaksyon sa ER-mitochondria nga nag-una sa mitochondrial fission [24]. Dugang pa sa papel niini sa mitochondrial fission, ang Drp1 nag-catalyze sa fission sa peroxisomes [40].

Ang Drp1 susama kaayo sa maayong pagkahulagway nga dynamin nga protina tungod kay ang duha ka protina adunay N-terminal GTPase domain, usa ka Middle domain nga kritikal alang sa self-oligomerization, ug usa ka C-terminal GTPase effector domain [31]. Nakab-ot sa Drp1 ang pagkapili alang sa mga membrana sa mitochondrial pinaagi sa usa ka kombinasyon sa mga interaksyon sa mga protina sa receptor nga Mff ug Fis1 ug usab pinaagi sa pagkadugtong niini alang sa piho nga mitochondria nga phospholipid cardiolipin pinaagi sa talagsaon nga B-insert domain sa Drp1 [2]. Ang Drp1 kasagaran anaa isip usa ka homotetramer sa cytoplasm, ug ang mas taas nga order nga asembliya sa mitochondrial fission sites gipataliwad-an sa Middle domain sa Drp1 [3].

Tungod sa implicit nga link tali sa mitochondrial function ug sa KEAP1-Nrf2-ARE nga agianan, among gisusi ang mga epekto sa Nrf2 activation sa mitochondrial structure ug function. Gipakita namo dinhi nga ang SFN nag-aghat sa mitochondrial hyperfusion nga, sa wala damha, independente sa Nrf2 ug KEAP1. Kini nga epekto sa SFN pinaagi sa usa ka pagpugong sa Drp1 function. Gipakita pa namon nga ang SFN naghatag og resistensya sa apoptosis nga Nrf2-independente ug nagsundog nga nakita sa mga selula nga nahurot sa Drp1. Kini nga mga datos kolektibong nagpakita nga dugang sa pagpalig-on ug pagpaaktibo sa Nrf2, ang SFN nag-modulate sa mitochondrial dynamics ug nagpreserbar sa cellular fitness ug survival.

Resulta

Sulforaphane Induces Nrf2 / KEAP1-Independent Hyperfusion sa Mitochondria

Sa kurso sa pagtuon sa mga epekto sa Nrf2 activation sa mitochondrial network dynamics, among nadiskobrehan nga ang pagtambal sa imortalized, human retinal pigment epithelial (RPE-1) nga mga selula nga adunay sulforaphane (SFN), usa ka potent activator sa Nrf2 signaling, nag-aghat sa usa ka lig-on nga fusion sa ang mitochondrial network kon itandi sa mga control cell nga giatiman sa sakyanan (Fig. 1A ug B). Ang morpolohiya sa mitochondria niini nga mga selula susama kaayo sa mitochondria sa mga selula nga nahurot sa siRNA sa endogenous Drp1, ang pangunang mitochondrial fission factor (Fig. 1A). Kini nga resulta nagpataas sa makaiikag nga ideya nga ang mitochondrial fission ug fusion status direktang motubag sa Nrf2 nga lebel sa selula. Bisan pa, ang stimulation sa mga selula nga adunay uban pang mga Nrf2 stabilizer ug activators sama sa proteasome inhibitor MG132, ang pro-oxidant tBHQ, o knockdown sa Nrf2 inhibitor KEAP1 wala mag-aghat sa mitochondrial fusion (Fig. 1A ug B). Ang pagpalig-on sa Nrf2 pinaagi niini nga mga manipulasyon gipamatud-an sa western blotting alang sa endogenous Nrf2 (Fig. 1C). Dugang pa, ang pagpahayag sa Nrf2 kay dispensable alang sa SFN-induced mitochondrial fusion, tungod kay ang knockdown sa endogenous Nrf2 nga adunay siRNA napakyas sa pagsumpo niini nga phenotype (Fig. 1D'F). Tungod kay ang SFN nagdasig sa KEAP1-Nrf2-ARE nga agianan pinaagi sa covalently modifying cysteine ​​​​residues sa KEAP1 [21], among gipukan ang KEAP1 aron matubag kung ang SFN-induced mitochondrial hyperfusion gipalihok pinaagi sa usa ka KEAP1-dependent, apan Nrf2 independent pathway. Bisan pa, ang pagkunhod sa KEAP1 napakyas usab sa pagwagtang sa SFN-induced mitochondrial fusion (Fig. 1G'I). Sa tinuud, gibalikbalik sa SFN ang pro-fission morphology nga gipahinabo sa pagkunhod sa KEAP1 (Fig. 1G, panel b versus panel d). Kini nga mga resulta nagpakita nga ang SFN nga pagtambal maoy hinungdan sa mitochondrial fusion nga independente sa kanonikal nga KEAP1-Nrf2-ARE nga agianan ug mitultol kanato sa pagsukitsukit kon ang SFN direktang makaapekto sa mga sangkap sa mitochondrial fission o fusion nga makinarya.

Sulforaphane Makadaot sa Mitochondrial Association sa Drp1

Base sa pagpangita nga ang SFN-pagtambal nag-aghat sa mitochondrial hyperfusion, nangatarungan kami nga kini nga phenotype usa ka sangputanan sa sobra nga kalihokan sa fusion o usa ka pagdili sa kalihokan sa fission. Sa pagpihig tali niining duha ka mga posibilidad, among gitandi ang morpolohiya sa mga peroxisome sa presensya ug pagkawala sa SFN. Ang mga peroxisome susama sa mitochondria tungod kay kini mga dinamikong organel nga ang porma ug gitas-on niini kanunay nga naglihok [44]. Ang mga peroxisome naglangkob sa Fis1 ug Mff sa ilang gawas nga lamad ug, isip sangputanan, mga target alang sa Drp1-mediated fission [22], [23]. Bisan pa, ang mga peroxisome wala mogamit sa fusion machinery sa mitochondrial network ug busa, dili moagi sa fusion [39]. Hinunoa, ang peroxisomal fission gisupak sa pagpalugway sa kasamtangan nga mga peroxisome pinaagi sa de novo nga pagdugang sa mga lamad ug mga protina [44]. Tungod kay ang mga peroxisome kulang sa Mfn1 / 2 ug OPA1, nangatarungan kami nga kung ang SFN mag-aktibo sa makinarya sa fusion kaysa magpugong sa makinarya sa fission, ang gitas-on sa peroxisome dili maapektuhan. Sa mga selula nga gitambalan sa sakyanan, ang mga peroxisome gipabilin ingong mugbo, lingin, punctiform organelles (Fig. 2, mga panel b ug d). Bisan pa, ang pagtambal sa SFN nagdugang sa gitas-on sa peroxisome sa ~ 2-pilo kon itandi sa pagkontrol sa mga selula (Fig. 2, mga panel f ug h). Dugang pa, daghan sa mga peroxisome ang gipiit duol sa sentro, nga nagpakita sa usa ka potensyal nga scission depekto (Fig. 2, panel h, arrowheads). Sa samang paagi, ang mga peroxisome sa mga selula nga gibalhin sa Drp1 siRNA kay abnormal ang gitas-on (Fig. 2, panels j ug l), nga nagpamatuod nga ang Drp1 gikinahanglan alang sa peroxisomal fission ug nagsugyot nga ang SFN-treatment maoy hinungdan sa mitochondrial ug peroxisomal phenotypes pinaagi sa pagguba sa fission machinery.

Sunod namong gitino kung giunsa pagdili sa SFN ang function sa Drp1. Ang mga posibilidad naglakip sa pagkunhod sa lebel sa ekspresyon, pagrekrut / pagpabilin sa mitochondria, oligomerization, o enzymatic nga kalihokan sa GTPase. Ang kakulangan sa bisan hain niini moresulta sa pagkunhod sa mitochondrial fission ug hyperfusion. Wala kami makamatikod nga mabag-o nga mga pagbag-o sa lebel sa protina sa Drp1 human sa SFN-treatment (Fig. 1C ug 3A), ug busa mihinapos nga ang SFN wala mag-usab sa Drp1 nga kalig-on o ekspresyon, nga nahiuyon sa Drp1 nga adunay tunga sa kinabuhi nga> 10 h [50] ug ang among mga pagtambal sa SFN nga mas mubo nga gidugayon. Sunod, among gisusi kung ang SFN nakaapekto sa pagrekrut o pagpadayon sa Drp1 sa mitochondria. Ang mga pagtuon sa fractionation nagpakita nga ang SFN nag-aghat sa pagkawala sa Drp1 gikan sa mitochondrial fraction (Fig. 3A, lane 7-8 ug Fig. 3B). Sama sa gitaho kaniadto [43], usa lamang ka gamay nga tipik sa Drp1 (~ 3%) ang nalangkit sa mitochondrial network sa bisan unsang panahon sa panahon sa makanunayon nga kahimtang sa estado uban sa kadaghanan sa enzyme nga nagpuyo sa cytoplasm (Fig. 3A, mga lane 5'8 ). Kini nga mga datos sa fractionation gikumpirma gamit ang co-localization analysis nga nagpakita sa usa ka ~ 40% nga pagkunhod sa mitochondria-localized, punctate Drp1 foci human sa SFN-treatment (Fig. 3C ug D). Sa tingub, kini nga mga datos nagpakita nga ang mitochondrial fusion nga gipahinabo sa SFN, labing menos partially, tungod sa attenuated association sa Drp1 uban sa mitochondria. Ang among datos wala makaila kon ang SFN makabalda sa mitochondrial recruitment kumpara sa mitochondrial retention sa Drp1, o pareho, tungod kay ang pag-analisa sa endogenous Drp1 dili uyon sa paghanduraw sa GTPase pinaagi sa live-cell microscopy.

Ang Sulforaphane Naghatag Proteksyon Batok sa Staurosportine-Induced Apoptosis Independent sa Nrf2

Gipakita sa miaging trabaho nga ang mitochondrial fission permissive sa pagporma sa mga pores sa gawas nga mitochondrial membrane nga gihimo ni Bax / Bak sa panahon sa apoptosis [11]. Ang Drp1 gipakita nga pinili nga gi-recruit sa mitochondria atol sa apoptosis [11] ug, nahiuyon niini, ang tipik nga mitochondria naobserbahan sayo sa proseso [27]. Sa kasukwahi, ang pagpugong sa mitochondrial fission gituohan nga makapugong sa apoptosis pinaagi sa pagbabag sa pagporma sa mga pores sa gawas nga lamad nga nagtugot sa pagpagawas sa cytochrome c [53]. Tungod niini, ang pagpukaw sa mitochondrial fusion naglangan sa pag-uswag sa apoptosis nga gipahinabo sa mga compound lakip ang staurosporine (STS) [14]. Aron mahibal-an kung gipanalipdan sa SFN ang mga selula sa RPE-1 gikan sa STS-mediated apoptosis ug kung mao, kung kini nanginahanglan Nrf2, nagtukod kami usa ka assay aron dali nga maaghat ang poly ADP ribose polymerase (PARP) cleavage, usa ka substrate sa gi-aktibo nga caspase-3 ug definitive marker sa apoptosis. Ang pagtambal sa RPE-1 nga mga selyula nga adunay 1 �M STS sulod sa 6 ka oras hinungdan lamang sa kasarangan nga cleavage sa PARP apan napugngan kini sa SFN co-treatment (eg, Fig. 4A, lane 3 versus 4). Aron madugangan ang kalig-on sa kini nga assay, labi namon nga gipasensitibo ang mga selyula sa apoptosis nga gipahinabo sa STS pinaagi sa pag-pre-treat kanila sa siRNA nga gipunting ang anti-apoptotic factor, Bcl-XL. Kini nga pretreatment nagpamenos sa ekspresyon sa Bcl-XL ug nagpasiugda pag-ayo sa PARP cleavage isip function sa oras nga na-expose sa STS (Fig. 4B, itandi ang lane 2 ngadto sa mga lane 4-10). Importante, ang 2 h sa pre-treatment nga adunay SFN migaan sa PARP cleavage sa mga selula nga naladlad sa STS (Fig. 4C, lane 3 versus 4 ug lane 5 versus 6). Sa samang paagi, ang mga selula nga lig-on nga nahurot sa Nrf2 sa CRISPR / Cas9 susama nga gipanalipdan gikan sa STS toxicity pinaagi sa SFN pre-treatment (Fig. 4C, lane 11 versus 12 ug lane 13 versus 14 ug Fig. 4D). Kini nga proteksyon naobserbahan gamit ang PARP cleavage (Fig. 4C ug D) ug cellular morphology (Fig. 4E) isip readouts. Ang kaepektibo sa Nrf2 depletion sa CRISPR / Cas9 gipamatud-an sa western blotting (Fig. 4C, Nrf2 blot). Sama sa gitagna, ang pagkunhod sa mga selula sa Drp1, nga naghatag usab og hyperfusion phenotype (Fig. 1A), gibabagan usab ang PARP cleavage agig tubag sa STS kumpara sa pagkontrol sa mga selula nga gilumlum sa SFN (Fig. 4F ug G). Mag-uban, kini nga mga nahibal-an nahiuyon sa SFN nga naghatag proteksyon batok sa apoptosis pinaagi sa kapasidad niini sa pagpugong sa Drp1 function, nga independente sa pag-stabilize ug pagpaaktibo sa Nrf2.

Panaghisgutan

Nadiskobrehan namon nga ang SFN nag-modulate sa mitochondrial fission / fusion dynamics nga independente sa mga epekto niini sa KEAP1-Nrf2-ARE nga agianan. Makapainteres kini tungod sa gituohan nga link tali sa mitochondrial dysfunction ug ROS production ug ang panginahanglan sa pagpuga sa mitochondria-derived free radicals pinaagi sa pagpaaktibo sa Nrf2. Kini nga dugang nga functional nga epekto sa SFN adunay potensyal nga importansya tungod sa labaw pa sa 30 nga mga klinikal nga pagsulay nga karon nagpadayon sa pagsulay sa SFN alang sa pagtambal sa lainlaing mga sakit lakip na ang kanser sa prostate, obstructive pulmonary disease, ug sickle cell disease [7], [10], [ 47].

Tungod kay ang SFN usa ka isothiocyanate [56] ug kini nagpalihok sa Nrf2 signaling pinaagi sa direkta nga pag-acylating sa kritikal nga KEAP1 cysteinees aron sumpuon ang Nrf2 degradation [21], kini nagsunod nga ang SFN naggamit sa iyang pro-fusion nga mga epekto pinaagi sa modulating sa kalihokan sa usa ka fission o fusion factor pinaagi sa cysteine ​​​​modification . Ang among datos kusganong nagsuporta sa Drp1 nga negatibo nga gi-regulate sa SFN bisan kung ang GTPase usa ka direkta nga target sa acylation nagpabilin nga gipatin-aw. Bisan pa niini nga kal-ang sa kahibalo, ang function sa Drp1 tin-aw nga gikompromiso sa SFN tungod kay ang mitochondria ug peroxisomes nahimong hyperfused agig tubag sa SFN nga pagtambal ug kini nga mga organelles nag-ambit sa Drp1 alang sa ilang tagsa-tagsa nga scission nga mga panghitabo [38]. Dugang pa, gipaubos sa SFN ang gidaghanon sa Drp1 nga nag-localize ug natipon sa mitochondria (Fig. 3). Tungod kay ang among mga eksperimento gihimo sa tanan nga endogenous nga mga protina, ang among pagkakita sa Drp1 sa mga mitochondrial fission nga mga site ubos sa mga kondisyon nga makanunayon, ug tungod niini, dili kami makaila tali sa usa ka recruitment batok sa usa ka depekto sa pagpadayon sa enzyme nga gipahinabo sa SFN. Dugang pa, dili nato mawagtang ang posibilidad nga ang SFN mag-acylate sa usa ka receptor sa mitochondria (Fis1 o Mff) aron babagan ang Drp1 recruitment pa, nagduda kami nga ang Drp1 direktang giusab. Ang Drp1 adunay siyam ka mga cysteine, walo niini nagpuyo sulod sa Middle Domain nga gikinahanglan alang sa oligomerization [3], ug ang usa niini anaa sa GTPase Effector Domain (GED) sa C-terminus sa Drp1. Ang direktang acylation sa bisan unsa niini nga mga cysteine ​​mahimong hinungdan sa usa ka depekto sa kalihokan sa Drp1 ug busa nagpailalom sa epekto sa SFN sa mitochondrial dynamics. Ilabi na, ang una nga trabaho nagsugyot nga ang mga depekto sa oligomerization ug catalytic nga kalihokan mahimong mawagtang ang pagpabilin sa Drp1 sa mitochondria [52]. Ang Cys644 sa GED domain usa ka partikular nga madanihon nga target base sa miaging trabaho nga nagpakita nga ang mutation niining cysteine ​​phenocopies mutation nga makadaut sa Drp1 GTPase nga kalihokan [4] ug nga kini nga partikular nga cysteine ​​​​giusab sa thiol-reactive electrophiles [9]. Ang resolusyon niining talagsaong pangutana magkinahanglan ug mass spectrometric validation.Sa katingbanan, nakaila mi og nobela, cytoprotective function alang sa clinically-relevant compound nga SFN. Dugang sa pagpaaktibo sa master anti-oxidant transcription factor Nrf2, ang SFN nagpasiugda sa mitochondrial ug peroxisomal fusion, ug kini nga epekto independente sa Nrf2. Ang mekanismo nga nagpahipi niini nga panghitabo naglakip sa pagkunhod sa function sa GTPase Drp1, ang nag-unang tigpataliwala sa mitochondrial ug peroxisomal fission. Usa ka dakong sangputanan sa SFN-mediated mitochondrial fusion mao nga ang mga selula mahimong makasugakod sa makahilo nga mga epekto sa apoptosis inducer staurosporine. Kini nga dugang nga cytoprotective nga aksyon sa SFN mahimong usa ka partikular nga klinikal nga gamit sa daghang mga sakit nga neurodegenerative diin ang edad mao ang nanguna nga risgo nga hinungdan (pananglitan, Parkinson's Disease, Alzheimer's Disease, Age-related Macular Degeneration) tungod kay kini nga mga sakit adunay kalabotan sa apoptosis ug pagkunhod. lebel ug / o dysregulation sa Nrf2 [35], [36], [48].

Mga Materyal ug Pamaagi

Pagsusi sa Apoptosis

Ang mga selula gisabod ug gibalhin sa siRNA sama sa gipakita sa ubos. Ang mga selula gi-pre-treat sa 50 ?M sulforaphane sulod sa 2 ka oras aron maaghat ang mitochondrial fusion ug dayon gitambalan sa 1 ?M staurosporine aron maaghat ang apoptosis. Sa panahon sa pag-ani, ang media gikolekta sa tagsa-tagsa nga mga tubo ug gipailalom sa high speed centrifugation sa pellet apoptotic cells. Kini nga cell pellet gihiusa uban sa mga adherent cells ug natunaw sa 2 ka beses nga gikonsentrahan nga Laemmli buffer. Ang mga sample gipailalom sa anti-PARP western blotting.

CRISPR/Cas9 Construct Generation

Aron makamugna ang LentiCRISPR/eCas9 1.1, ang LentiCRISPR v2 (addgene #52961) unang giputol sa Age1 ug BamH1. Sunod, ang SpCas9 gikan sa eSpCas9 1.1 (addgene #71814) gipadako sa PCR gamit ang Age1 ug BamH1 nga mga overhang gamit ang mga musunod nga primers (Ipasa ang AGCGCACCGGTTCTAGAGCGCTGCCACCATGGACTATAAGGACCAGGAC, Reverse AAGCGCGGGTCCCTTTTTCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT ug gi-ligat sa ibabaw sa vector. Ang mga han-ay sa sgRNA gitino pinaagi sa paggamit sa Benchling.com. Ang mga parametro gitakda nga target ang coding sequence nga adunay pinakataas nga on-target ug pinakaubos nga off-target scores. Ang mosunod nga mga han-ay (target ay Gipasiugda, HS sgNFE2L2 # 1 pagbati CACCGCGACGGAAAGAGTATGAGC, antisense AAACGCTCATACTCTTTCCGTCGC; nakapagamhanan sgNFE2L2 # 2 pagbati CACCGGTTTCTGACTGGATGTGCT, antisense AAACAGCACATCCAGTCAGAAACC; nakapagamhanan sgNFE2L2 # 3 pagbati CACCGGAGTAGTTGGCAGATCCAC, antisense AAACGTGGATCTGCCAACTACTCC) ang annealed ug ligated sa BsmB1 giputol LentiCRISPR / eCas9 1.1. Ang lentivirally infected nga RPE-1 nga mga selula gipili nga adunay puromycin ug gipadayon isip usa ka pooled nga populasyon. Ang knockout gikumpirma pinaagi sa immunofluorescence ug western blotting.

Kultura sa Cell ug mga Pagbalhin

Ang human retinal pigment epithelial cells nga nabag-o sa telomerase (RPE-1) (ATCC) gi-culture sa Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) nga adunay sulud nga 1 g / L glucose nga gidugangan sa penicillin, streptomycin, 1X non-essential amino acid cocktail (Life Technologies), ug 10% Fetal Bovine Serum (Life Technologies). Para sa siRNA-transfections, 30,000-35,000 cells/mL ang gisabod sa tibuok gabii. Ang mga selyula nakadawat 10 nM siRNA nga lasaw sa serum-free DMEM ug inubanan sa 0.3% Interferin transfection reagent (PolyPlus). Alang sa pagkasensitibo sa apoptosis, ang mga selula nakadawat 1 nM Bcl-XL siRNA. Ang mga selula anihon 2-3 ka adlaw human sa pagbalhin.

Mga Kemikal, Antibodies, ug siRNA Oligos

Antibodies batok sa ?-tubulin (Cell Signaling), ?-tubulin (Sigma), Drp1 (BD Biosciences), KEAP1 (Proteintech), Lamin B1 (Abcam), PARP (Cell Signaling), PMP70 (Abcam), ug Tom20 (BD Biosciences). ) gigamit sa 1:1000 dilutions para sa western blotting ug para sa immunofluorescence. In-house, anti-Nrf2 rabbit antibody gigamit sa 1:2000 para sa western blotting [34], [59]. Ang Sulforaphane (Sigma) ug staurosporine (Tocris) gigamit sa 50 ?M ug 1 ?M matag usa. Ang mga siRNA batok sa Drp1 (Dharmacon), Nrf2 (Dharmacon), KEAP1 (Cell Signaling), ug Bcl-XL (Cell Signaling) gigamit sa 10 nM gawas kung nahibal-an.

Immunofluorescence ug sa Vivo Labeling

Ang mga selula nga gisabwag sa 18 mm nga glass coverslips gitambalan sa sakyanan o droga, gitakda sa 3.7% formaldehyde ug dayon gi-permeabilize sa 0.2% Triton X-100/PBS sa yelo sulod sa 10 min. Ang mga nag-unang antibodies gipalumlom sa 3% nga bovine serum albumin (BSA) sa PBS sa tibuok gabii sa 4 ° C. Pagkahuman sa paghugas sa PBS, ang mga selyula gilumlom sa 1 ka oras sa angay nga mga espisye, Alexa488- o Alexa546-, conjugated secondary antibodies (diluted 1: 1000) ug 0.1 ?g/mL DAPI (Sigma) sa 3% BSA/PBS. Ang mitochondria makita pinaagi sa anti-Tom20 immunofluorescence o pinaagi sa paglumlum sa mga selula sa 200 nM MitoTracker Red CMXRos (Molecular Probes, Inc.) sa serum-free DMEM sulod sa 30 min sa 37 �C sa wala pa ang fixation.

Microscopy ug Image Analysis

Ang mga sample sa immunofluorescence gitan-aw sa LSM710 Confocal microscope (Carl Zeiss). Gikuha ang mga micrograph gamit ang 63X o 100X nga katuyoan sa pagpaunlod sa lana ug mga imahe nga gi-adjust ug gipauswag gamit ang Adobe Photoshop CS6. Ang pag-analisa sa co-localization gihimo gamit ang Carl Zeiss LSM710 nga co-localization nga bahin nga adunay mga threshold nga mano-mano nga gitakda samtang gibutaan sa identidad sa mga sample. Ang mga scale bar sa tibuok, gawas kung gipahibalo, mao ang 10 �m. Ang mitochondrial morphology gisusi pinaagi sa blinded scoring. Kung ang mitochondria sa usa ka cell gimentinar isip multiple, round, discriminate puncta, ang cell gi-iskor isip �fission�. Kung ang indibidwal nga mitochondria dili mailhan ug ang tibuuk nga network sa mitochondrial nagpakita nga padayon, ang selyula gi-iskor ingon �fusion�. Ang tanan nga uban nga mga selyula, lakip ang mga adunay clustering mitochondria, gi-iskor isip �intermediate�.

Subcellular Fractionation

Ang mga selula sa RPE-1 gipatubo ngadto sa panagtagbo. Pagkahuman sa paghugas sa PBS, ang mga selyula gipailalom sa centrifugation sa 600'g alang sa 10 min ug gisuspinde sa 600 ?L isolation buffer (210 mM Mannitol, 70 mM Sucrose, 5 mM MOPS, 1 mM EDTA pH 7.4 + 1 mM PMSF). Ang suspensyon gi-lysed 30 ka beses sa usa ka Dounce homogenizer. Ang usa ka tipik sa homogenate gipreserbar isip usa ka �whole cell lysate.� Ang nahibilin gipailalom sa centrifugation sa 800�g sulod sa 10 min ngadto sa pellet nuclei. Ang mga supernatant gipailalom sa centrifugation sa 1500'g sulod sa 10 min aron malimpyohan ang nahabilin nga nuclei ug unlysed cells. Kini nga supernatant gipailalom sa centrifugation sa 15,000'g sulod sa 15 min sa pellet mitochondria. Ang supernatant gipreserbar isip �cytosolic fraction�. Ang pellet hinayhinay nga gihugasan gamit ang PBS ug gisuspinde pag-usab sa isolation buffer. Ang konsentrasyon sa protina sa matag tipik gisukod sa bicinchoninic acid (BCA) assay ug ang katumbas nga kantidad sa protina nasulbad sa SDS-PAGE.

Western Blotting

Ang mga selula gihugasan sa PBS ug natunaw sa 2 ka beses nga gikonsentrar nga Laemmli solubilizing buffer (100 mM Tris [pH 6.8], 2% SDS, 0.008% bromophenol blue, 2% 2-mercaptoethanol, 26.3% glycerol, ug 0.001% . Ang mga lysate gilat-an sulod sa 5 ka minuto sa wala pa i-load sa sodium dodecyl sulfate (SDS) polyacrylamide gels. Ang mga protina gibalhin ngadto sa nitrocellulose membrane ug ang mga lamad gibabagan sulod sa 1 ka oras sa 5% Milk/TBST. Ang mga nag-unang antibodies natunaw sa 5% nga Gatas / TBST ug gilumlom sa blot sa tibuok gabii sa 4 ° C. Horseradish peroxidase (HRP) -conjugated secondary antibodies lasaw sa 5% Milk/TBST. Ang mga blots giproseso nga adunay gipaayo nga chemiluminescence ug ang densitometric nga mga quantification gihimo gamit ang ImageJ software.

Ang Sulforaphane usa ka kemikal gikan sa isothiocyanate nga koleksyon sa organosulfur substances nga nakuha gikan sa cruciferous nga mga utanon, lakip na ang broccoli, cabbage, cauliflower, kale, ug collards, ug uban pa. Ang Sulforaphane gihimo sa dihang ang enzyme myrosinase nag-usab sa glucoraphanin, usa ka glucosinolate, ngadto sa sulforaphane, nailhan usab nga sulforaphane-glucosinolate. Ang broccoli sprouts ug cauliflower adunay pinakataas nga konsentrasyon sa glucoraphanin o ang pasiuna sa sulforaphane. Gipakita sa mga pagtuon sa panukiduki nga ang sulforaphane nagpauswag sa kapabilidad sa antioxidant sa lawas sa tawo aron mapugngan ang lainlaing mga isyu sa kahimsog. Dr. Alex Jimenez DC, CCST Insight

Sulforaphane ug ang mga Epekto Niini sa Kanser, Pagka-mortal, Pagkatigulang, Utok ug Panggawi, Sakit sa Kasingkasing ug uban pa

Ang Isothiocyanates mao ang pipila sa labing hinungdanon nga mga compound sa tanum nga makuha nimo sa imong pagkaon. Niini nga video gihimo nako ang labing komprehensibo nga kaso alang kanila nga nahimo sukad. Mubo nga gidugayon sa pagtagad? Laktaw sa imong paborito nga hilisgutan pinaagi sa pag-klik sa usa sa mga punto sa oras sa ubos. Full timeline sa ubos.

Pangunang mga seksyon:

• 00:01:14 – Kanser ug mortalidad
• 00:19:04 - Pagkatigulang
• 00:26:30 - Utok ug pamatasan
• 00:38:06 - Katapusan nga recap
• 00:40:27 - Dosis

Tibuok timeline:

• 00:00:34 - Pagpaila sa sulforaphane, usa ka mayor nga focus sa video.
• 00:01:14 - Pagkonsumo sa cruciferous nga utanon ug pagkunhod sa tanan nga hinungdan sa pagkamatay.
• 00:02:12 - Risgo sa kanser sa prostate.
• 00:02:23 - Risgo sa kanser sa pantog.
• 00:02:34 - Ang kanser sa baga sa mga nanigarilyo peligro.
• 00:02:48 - Risgo sa kanser sa suso.
• 00:03:13 - Hypothetical: unsa man kung ikaw adunay kanser? (interbensyonal)
• 00:03:35 - Katuohan nga mekanismo nga nagmaneho sa kanser ug mortalidad nga asosasyon nga datos.
• 00:04:38 - Sulforaphane ug kanser.
• 00:05:32 - Ang ebidensya sa hayop nga nagpakita sa kusog nga epekto sa broccoli sprout extract sa pag-uswag sa tumor sa pantog sa mga ilaga.
• 00:06:06 - Epekto sa direktang suplemento sa sulforaphane sa mga pasyente sa kanser sa prostate.
• 00:07:09 - Bioaccumulation sa isothiocyanate metabolites sa aktwal nga tisyu sa dughan.
• 00:08:32 - Pagpugong sa mga stem cell sa kanser sa suso.
• 00:08:53 - Leksyon sa kasaysayan: ang mga brassicas gitukod nga adunay mga kabtangan sa kahimsog bisan sa karaang Roma.
• 00:09:16 - Ang abilidad sa Sulforaphane sa pagpalambo sa carcinogen excretion (benzene, acrolein).
• 00:09:51 - NRF2 isip genetic switch pinaagi sa antioxidant response elements.
• 00:10:10 - Sa unsang paagi ang pagpaaktibo sa NRF2 makapauswag sa carcinogen excretion pinaagi sa glutathione-S-conjugates.
• 00:10:34 - Ang Brussels sprouts nagdugang sa glutathione-S-transferase ug makapamenos sa kadaot sa DNA.
• 00:11:20 - Ang broccoli sprout nga ilimnon nagdugang sa benzene excretion sa 61%.
• 00:13:31 - Ang homogenate nga pagtubo sa broccoli nagdugang antioxidant enzymes sa taas nga agianan sa hangin.
• 00:15:45 - Pagkonsumo sa cruciferous nga utanon ug pagkamatay sa sakit sa kasingkasing.
• 00:16:55 - Ang broccoli sprout powder nagpauswag sa mga lipid sa dugo ug sa kinatibuk-ang risgo sa sakit sa kasingkasing sa type 2 nga mga diabetes.
• 00:19:04 - Pagsugod sa seksyon sa pagkatigulang.
• 00:19:21 - Sulforaphane-enriched nga pagkaon nagpauswag sa kinabuhi sa mga bakukang gikan sa 15 ngadto sa 30% (sa pipila ka mga kondisyon).
• 00:20:34 - Ang kamahinungdanon sa ubos nga panghubag alang sa taas nga kinabuhi.
• 00:22:05 - Ang cruciferous nga mga utanon ug broccoli sprout powder daw makapakunhod sa nagkalainlain nga mga marker sa panghubag sa mga tawo.
• 00:23:40 - Mid-video recap: kanser, mga seksyon sa pagkatigulang
• 00:24:14 - Ang mga pagtuon sa mouse nagsugyot nga ang sulforaphane mahimong makapauswag sa adaptive immune function sa pagkatigulang.
• 00:25:18 - Ang Sulforaphane nagpauswag sa pagtubo sa buhok sa usa ka modelo sa mouse sa pagkalbo. Hulagway sa 00:26:10.
• 00:26:30 - Pagsugod sa seksyon sa utok ug pamatasan.
• 00:27:18 - Epekto sa broccoli sprout extract sa autism.
• 00:27:48 - Epekto sa glucoraphanin sa schizophrenia.
• 00:28:17 - Pagsugod sa diskusyon sa depresyon (katuohan nga mekanismo ug pagtuon).
• 00:31:21 - Ang pagtuon sa mouse gamit ang 10 ka lain-laing mga modelo sa stress-induced depression nagpakita sa sulforaphane nga parehas nga epektibo sama sa fluoxetine (prozac).
• 00:32:00 - Gipakita sa pagtuon nga ang direkta nga pag-inom sa glucoraphanin sa mga ilaga parehas nga epektibo sa pagpugong sa depresyon gikan sa sosyal nga kapildihan nga modelo sa stress.
• 00:33:01 - Pagsugod sa seksyon sa neurodegeneration.
• 00:33:30 - Sulforaphane ug Alzheimer's disease.
• 00:33:44 - Sulforaphane ug Parkinson's disease.
• 00:33:51 - Sulforaphane ug sakit sa Hungtington.
• 00:34:13 - Ang Sulforaphane nagdugang sa mga protina sa heat shock.
• 00:34:43 - Pagsugod sa seksyon sa traumatic brain injury.
• 00:35:01 - Sulforaphane gi-injected dayon human ang TBI nagpalambo sa memorya (pagtuon sa mouse).
• 00:35:55 ​​- Sulforaphane ug neuronal plasticity.
• 00:36:32 - Ang Sulforaphane nagpauswag sa pagkat-on sa modelo sa type II diabetes sa mga ilaga.
• 00:37:19 - Sulforaphane ug duchenne muscular dystrophy.
• 00:37:44 - Pagpugong sa Myostatin sa mga selula sa satellite sa kalamnan (in vitro).
• 00:38:06 - Late-video recap: mortalidad ug kanser, kadaot sa DNA, oxidative stress ug panghubag, benzene excretion, sakit sa cardiovascular, type II diabetes, mga epekto sa utok (depresyon, autism, schizophrenia, neurodegeneration), NRF2 nga agianan.
• 00:40:27 - Mga hunahuna sa paghunahuna sa usa ka dosis sa broccoli sprouts o sulforaphane.
• 00:41:01 - Mga anekdota sa pagtubo sa balay.
• 00:43:14 - Sa temperatura sa pagluto ug kalihokan sa sulforaphane.
• 00:43:45 - Ang pagkakabig sa bakterya sa gut sa sulforaphane gikan sa glucoraphanin.
• 00:44:24 - Ang mga suplemento mas maayo kung gihiusa sa aktibo nga myrosinase gikan sa mga utanon.
• 00:44:56 - Mga teknik sa pagluto ug cruciferous nga mga utanon.
• 00:46:06 - Isothiocyanates isip goitrogens.

Pasalamat

Sciencedirect.com/science/article/pii/S2213231716302750

Giunsa Paggama ang Sulforaphane?

Ang pagpainit nagpamenos sa Epithiospecifier Protein Activity ug Nagpataas sa Sulforaphane Formation sa Broccoli

abstract

Ang Sulforaphane, usa ka isothiocyanate gikan sa broccoli, usa sa labing kusgan nga anticarcinogens nga nakuha sa pagkaon. Kini nga compound wala diha sa intact nga utanon, hinoon kini naporma gikan sa iyang glucosinolate precursor, glucoraphanin, pinaagi sa aksyon sa myrosinase, usa ka thioglucosidase enzyme, sa diha nga ang broccoli tissue nadugmok o chewed. Bisan pa, daghang mga pagtuon ang nagpakita nga ang sulforaphane nga ani gikan sa glucoraphanin gamay, ug nga ang non-bioactive nitrile analog, sulforaphane nitrile, mao ang panguna nga produkto sa hydrolysis kung ang tisyu sa tanum madugmok sa temperatura sa kwarto. Ang bag-o nga ebidensya nagsugyot nga sa Arabidopsis, ang pagporma sa nitrile gikan sa glucosinolates gikontrol sa usa ka protina nga sensitibo sa kainit, epithiospecifier protein (ESP), usa ka non-catalytic cofactor sa myrosinase. Ang among mga katuyoan mao ang pagsusi sa mga epekto sa pagpainit sa mga bulak sa broccoli ug mga sprouts sa sulforaphane ug sulforaphane nitrile formation, aron mahibal-an kung ang broccoli adunay kalihokan sa ESP, dayon aron ma-correlate ang mga pagbag-o nga nagsalig sa kainit sa kalihokan sa ESP, sulud sa sulforaphane ug bioactivity, nga gisukod pinaagi sa induction sa phase II detoxification enzyme quinone reductase (QR) sa cell culture. Ang pagpainit sa lab-as nga broccoli florets o broccoli sprouts ngadto sa 60 �C sa wala pa ang homogenization dungan nga nagdugang sa sulforaphane formation ug mikunhod sa sulforaphane nitrile formation. Ang usa ka mahinungdanon nga pagkawala sa kalihokan sa ESP susama sa pagkunhod sa sulforaphane nitrile formation. Ang pagpainit sa 70 �C ug pataas nagpamenos sa pagkaporma sa duha ka produkto sa broccoli florets, apan dili sa broccoli sprouts. Ang induction sa QR sa kultura nga mouse hepatoma Hepa lclc7 nga mga selyula susama sa pagtaas sa sulforaphane formation.

Ang pag-pre-heating sa mga floret ug sprouts sa broccoli ngadto sa 60 �C dako kaayong pagtaas sa myrosinase-catalyzed formation sa sulforaphane (SF) sa mga extract sa tissue sa utanon human sa pagdugmok. Nalambigit kini sa pagkunhod sa pagporma sa sulforaphane nitrile (SF Nitrile) ug kalihokan sa epithiospecifier protein (ESP).

keywords: Broccoli, Brassica oleracea, Cruciferae, Kanser, Anticarcinogen, Sulforaphane, Sulforaphane nitrile, Epithiospecifier nga protina, Quinone reductase

Sa konklusyon, ang sulforaphane usa ka phytochemical nga makita sa broccoli, ug uban pang cruciferous nga mga utanon. Ang dili makontrol nga gidaghanon sa mga oxidant nga gipahinabo sa internal ug external nga mga hinungdan mahimong hinungdan sa oxidative stress sa lawas sa tawo nga sa katapusan mahimong hinungdan sa lainlaing mga isyu sa kahimsog. Ang Sulforaphane maka-aktibo sa paghimo sa Nrf2, usa ka transcription factor nga makatabang sa pag-regulate sa mga mekanismo sa pagpanalipod sa antioxidant nga nagkontrol sa tubag sa cell sa mga oxidant. Ang sakup sa among kasayuran limitado sa mga isyu sa kahimsog sa chiropractic ug spinal. Aron hisgutan ang hilisgutan, palihug ayaw pagpangutana kang Dr. Jimenez o kontaka kami sa�915-850-0900�.

Gi-curate ni Dr. Alex Jimenez

Gi-refer gikan sa: Sciencedirect.com

Dugang nga Hisgutan sa Hilisgutan:�Acute Back Pain

Sakit sa likod�usa sa labing kaylap nga hinungdan sa pagkabaldado ug wala’y trabaho nga mga adlaw sa tibuuk kalibutan. Ang sakit sa bukobuko hinungdan sa ikaduha nga kasagarang hinungdan sa pagbisita sa opisina sa doktor, nga mas daghan kaysa mga impeksyon sa taas nga respiratoryo. Gibana-bana nga 80 porsyento sa populasyon ang makasinati og sakit sa likod labing menos kausa sa tibuok nilang kinabuhi. Ang dugokan maoy usa ka komplikadong gambalay nga gilangkoban sa mga bukog, lutahan, ligaments, ug kaunuran, ug uban pang humok nga mga tisyu. Tungod niini, mga kadaot ug/o nagkagrabe nga mga kondisyon, sama sa�herniated discs, mahimong mosangpot sa mga sintomas sa sakit sa likod. Ang mga samad sa sports o mga aksidente sa awto sa kasagaran mao ang labing kanunay nga hinungdan sa sakit sa bukobuko, bisan pa, usahay ang pinakasimple nga mga paglihok mahimong adunay sakit nga mga sangputanan. Maayo na lang, ang alternatibong mga opsyon sa pagtambal, sama sa pag-atiman sa chiropractic, makatabang sa pagpagaan sa sakit sa likod pinaagi sa paggamit sa mga pag-adjust sa taludtod ug mga pagmaniobra sa manwal, nga sa katapusan makapauswag sa paghupay sa kasakit.

DUGANG DUGANG | IMPORTANTE NGA TOPIC: Girekomenda ang El Paso, TX Chiropractor

***